Produk

Fosforilasi protein ngatur macem-macem fungsi seluler lan nduweni peran kunci ing pangembangan awal tetanduran.Kanggo nglengkapi lan nggedhekake penyelidikan sadurunge fosforilasi protein ing tunas Arabidopsis, kita nggunakake pendekatan alternatif sing nggabungake ekstraksi protein ing kondisi non-denaturing karo kromatografi afinitas ion logam (IMAC) immobilized saka fosfoprotein utuh ing ekstrak Rubisco-depleted, banjur identifikasi. nggunakake elektroforesis gel rong dimensi (2-DE) lan kromatografi cair-tandem spektrometri massa (LC-MS / MS).Pencernaan trypsin ing-gel lan analisis bintik-bintik gel sing dipilih nemtokake 144 peptida lan residu fosforilasi, sing mung 18 fosfopeptida lan 8 fosfosit sing ditemokake ing basis data situs fosforilasi PhosPhAt 4.0 lan P3DB Arabidopsis thaliana.Luwih saka setengah saka 82 fosfoprotein sing diidentifikasi melu metabolisme karbohidrat, fotosintesis/respirasi utawa sms respon stres oksidatif.Pengayaan fosfoprotein utuh sadurunge 2-DE lan LC-MS / MS katon nambah deteksi threonine lan residu tirosin fosforilasi dibandhingake karo metode sing nggunakake pengayaan tingkat peptida, sing nuduhake yen loro pendekatan kasebut rada nglengkapi babagan jangkoan situs fosforilasi.Mbandhingake asil kanggo tunas enom karo sing dipikolehi sadurunge kanggo godhong Arabidopsis diwasa ngenali limang protein sing beda fosforilasi ing jaringan kasebut, nuduhake potensial teknik iki kanggo nyelidiki dinamika fosforilasi protein sajrone pangembangan tanduran.