Produk

Topologi membran saka domain saluran colicin E1 ditliti kanthi transfer energi resonansi fluoresensi (FRET).FRET nglibatake asam amino fluoresen (coumarin) sing dikode sacara genetis minangka donor lan residu sistein kanthi label selektif sing disambungake karo DABMI (4-(dimethylamino)phenylazophenyl-4'-maleimide) minangka akseptor FRET.Residu kumarin fluoresensi digabungake menyang protein liwat pasangan sintetase tRNA / aminoacyl-tRNA ortogonal sing ngidini gabung selektif menyang situs apa wae ing domain saluran colicin.Saben varian nduweni mutasi mandeg (TAG) kanggo penggabungan kumarin lan mutasi sistein (TGT) kanggo lampiran DABMI.Enem jarak interhelik ing heliks 1-6 ditemtokake nggunakake analisis FRET kanggo kahanan larut lan membran.Data FRET nuduhake owah-owahan gedhe ing jarak interhelik ing antarane heliks 3-6 nalika asosiasi membran nyedhiyakake wawasan anyar babagan struktur domain saluran membran.Umumé, efisiensi interhelik coumarin-DABMI FRET mudhun nalika ikatan membran, mbangun model payung kanggo saluran colicin.Model tentatif kanggo kahanan tertutup domain saluran dikembangake adhedhasar data FRET sing saiki lan sadurunge diterbitake.Model kasebut nyaranake susunan bunder saka heliks 1-7 ing arah jarum jam saka sisih ekstraselular lan asosiasi antarmuka membran heliks 1, 6, 7, lan 10 ngubengi jepit rambut transmembrane tengah sing dibentuk dening heliks 8 lan 9.